雙光束紫外可見分光光度計是一類很重要的分析儀器，是分析測試實驗室里常見的一種分析儀器，屬于光學(xué)儀器的一種，可廣泛應(yīng)用于醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、環(huán)保、地質(zhì)、機(jī)械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個方面，用來進(jìn)行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應(yīng)動力學(xué)研究等。

　　雙光束紫外可見分光光度計具有操作簡便、性能穩(wěn)定、使用靈活等優(yōu)點。其基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機(jī)物質(zhì)，引起分子中價電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜，反映了試樣的特征。 2紫外可見光的范圍內(nèi)，對于一個特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進(jìn)行定性分析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較，還能進(jìn)行定量分析。

　　隨著分光元器件及分光技術(shù)、檢測器件與檢測技術(shù)、大規(guī)模集成制造技術(shù)等的發(fā)展,以及單片機(jī)、微處理器、計算機(jī)和DSP技術(shù)的廣泛應(yīng)用，分光光度計的性能指標(biāo)不斷提高,并向自動化、智能化、高速化和小型化等方向發(fā)展。目前市場上的雙光束紫外可見分光光度計主要有兩類:掃描光柵型和固定光柵型。后者也常常被稱為CCD(PDA)光譜儀或多通道光度計。它們的主要構(gòu)成:光源、分光系統(tǒng)、探測器和軟件系統(tǒng)。

　　雙光束紫外可見分光光度計的校準(zhǔn)方法介紹：

　　1、校準(zhǔn)前，應(yīng)使儀器開機(jī)預(yù)熱足夠時間穩(wěn)定后進(jìn)行，一般至少30min后進(jìn)行。

　　2、采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時必須注意應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)值的復(fù)現(xiàn)條件下進(jìn)行校準(zhǔn)，否則會產(chǎn)生錯誤的校準(zhǔn)結(jié)果。例如，使用GBW (E)130066分光光度計標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行校準(zhǔn)時，必須滿足兩個條件：a．被校準(zhǔn)儀器的光譜帶寬應(yīng)該是2nm，若儀器光譜帶寬不能調(diào)節(jié)并大于2nm，則標(biāo)準(zhǔn)溶液給出的值不適用，應(yīng)該采用修正值；b．校準(zhǔn)時所采用的兩只石英比色皿應(yīng)該是內(nèi)徑(10±0．2)mm，并且在235nm、257nm、313nm、350nm處，具有很好的配對性，這樣才能復(fù)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)值。

　　3、使用標(biāo)準(zhǔn)溶液來校準(zhǔn)時，還必須特別注意校準(zhǔn)測量時的實驗室溫度，因為這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在不同溫度下有不同的透射比標(biāo)準(zhǔn)值。

　　4、標(biāo)準(zhǔn)用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)必須在說明書規(guī)定條件下保存，例如干涉濾光片應(yīng)該保在干燥潔凈的環(huán)境中，以免表面被污染、受潮開膠或霉變等。所有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均應(yīng)在證書上注明的有效期內(nèi)使用。

　　5、選用的中性濾光片標(biāo)準(zhǔn)值的不確定度一定要符合傳遞標(biāo)準(zhǔn)。校準(zhǔn)時，要注意標(biāo)準(zhǔn)濾光片的方向性。